产品概述
辣椒素受体(TRPV1)基因核酸检测试剂盒（PCR-荧光法）
操作说明书
【产品名称】
通用名称：辣椒素受体（TRPV1）基因核酸检测试剂盒（PCR-荧光法）
英文名称：TRPV1 Real-time PCR Kit
【包装规格】
48人份/盒&96人份/盒
【预期用途】
本品适用于培养细胞及取自人体组织中的辣椒素受体（TRPV1）基因的检测。
【检验原理】
本试剂盒利用实时荧光PCR检测技术，采用辣椒素受体（TRPV1）的一对特异性引物和一条特异性荧光探针，同时配有actin B 内参基因实现辣椒素受体基因的快速检测，内参基因质控提取及扩增过程。
【主要组成成分】
| 货号 | 801602-1 | 801602-2 |
| 组分 | 48份/盒 | 96份/盒 |
| 1、TRPV1 RT-PCR反应液 | 1.0ml×1支 | 1.0ml×2支 |
| 2、样本稀释液 | 1.0ml×1支 | 1.0ml×2支 |
| 3、Taq酶 | 12μl×1支 | 25μl×1支 |
| 4、MMLV酶 | 25μl×1支 | 50μl×1支 |
| 5、TRPV1阳性对照 | 100μl×1支 | 100μl×1支 |
| 6、TRPV1 阴性对照 | 0.5ml×1支 | 0.5ml×1支 |
【储存条件及有效期】
-20℃保存；避免反复冻融；有效期12个月。
【适用仪器】
全自动荧光PCR仪。
【样本要求】
样本采集及处理：
细胞采用胰酶或者Trizol 类似试剂消化下来，立刻进行试验；在2～8℃保存不超过72小时；-20℃保存不超过3个月。样本运送采用冰壶或加冰泡沫箱。
【检验方法】
核酸提取：
可使用商业化试剂盒提取RNA，提取的RNA于-20℃下保存，长期保存最好于-80℃条件下保存。
注：阴性、阳性对照不需再次提取。
2. 反应液的配置：
取出RT-PCR反应液，室温融化后，取相应份数（反应液20μl/T、Taq酶0.2μl/T、MMLV酶0.5/T）混匀，然后向各PCR反应管按20μl分装；再分别加入5μl抽提好的RNA模板或阴/阳性对照，盖好管盖；将反应管置于全自动荧光PCR检测仪中，参照仪器操作说明设定阴/阳性对照、待检样本参数进行RT-PCR反应，记录好样本摆放顺序。
3. RT-PCR扩增：
反应程序设定：第一步：50℃ 10 分钟；
第二步：95℃ 3 分钟；
第三步：95℃ 10 秒，58℃ 35 秒，40 个循环；
荧光素设定为FAM & HEX，在反应程序的第三步58℃末读取荧光值
【检验结果的解释】
综合分析仪器给出的各项数据，设定合理的阈值（Threshold）和基线（Baseline），使仪器给出正确的结果。阴性对照为阴性，阳性对照的CT值应≤38.0。否则，重做此次实验。结果判定如下表：
| TRPV1（FAM） | 结果判定 |
| ≤38.0 | 阳性 |
| >38.0 | 阴性 |
| 内参（HEX） | |
| ≤38.0 | 成功 |
| >38.0 | 失败 |
【注意事项】
- 实验前请仔细阅读本试剂盒说明书，严格按操作步骤执行；
- 整个实验操作过程以及PCR实验室的软硬件设施应符合卫生部颁布《临床基因扩增检验实验室管理办法》、《临床基因扩增检验实验室工作规范》等法规的要求；
- Taq酶和反转录酶使用前请稍离心至管底部，使用时于冰盒中放置；
- 不合理的样本采集、转运、储存及处理过程均有可能导致错误的检测结果；如果样本处理过程没有控制可能产生交叉污染，可能出现假阳性结果；
【生产企业】
企业名称：广州赛百纯生物科技有限公司
生产地址：广州广州市黄埔区联浦街道16号402单元
注册地址：广州广州市黄埔区联浦街道16号402单元
http://www.surbiopure.com
【产品说明书修改日期及批准日期】2024年4月
产品特点
产品视频
实验结果
技术参数
经典案例
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